Extraction des alcaloïdes et leur utilisation comme biocapteur pour la détection de l'urée.

Abstract

Le besoin en capteurs biochimique se fait de plus en plus ressentir, surtout dans le domaine biologique. Ces derniers permettent la détection précise et rapide d'une espèce chimique ou biologique ainsi que l'évaluation de sa qualité et de sa concentration. Dans ce travail, nous avons essayé de développer un biocapteur à base d’alcaloïdes pour détecter l'urée. l'alcaloïde utilisé est la théobromine. Cette dernière a été extraite du cacao poudre et a été immobilisée sur une électrode en or comme partie sensible (biorécepteur). La théobromine extraite a fait l'objet d'une caractérisation par : • Infrarouge. • Température de fusion. • Chromatographie sur couche mince CCM. Avant d'être utilisé sur le biocapteur, une étude cinétique de la réaction urée théobromine a été réalisée et les résultats ont montré une affinité entre la théobromine et l'urée. Cette affinité a été confirmée par IR (spectre avant et après réaction). La technique utilisée pour le dépôt de cet alcaloïde sur le biocapteur est la centrifugation ( spin coating). La théobromine ; avant d'être déposée a été mélangée avec d'autre additifs qui constituent en effet la membrane à déposer. Les différentes membranes utilisées sont : 1. Cas de la membrane composée de (Théobromine extraite+ PVC+DOP solubilisés dans THF). 2. Cas de la membrane composée de (Théobromine extraite sans PVC+DOP solubilisés dans THF). 3. Cas de la membrane composée de (Théobromine commerciale sans PVC+DOP solubilisés dans THF). Les voltamogrammes obtenus pou les différents biocapteurs ainsi que les courbes de calibrations, nous ont montrés clairement qu'une bonne sensibilité vis-à-vis de l'urée de la membrane préparée à base de la théobromine extraite est meilleure par rapport aux autres membranes. Aussi, et pour cette même membrane, la présence du PVC a diminué le transfert électronique à travers l'électrode et par la même l’activité de la membrane. Cette diminution ce se manifeste par un domaine d'intensité faible à différentes concentrations d'urée (Fig 111.26) par rapport à la même membrane sans PVC. La comparaison de la sensibilité vis-à-vis de l'analyse testé (urée) entre la théobromine extraite et celle commerciale, montre aussi que la membrane à base de la théobromine extraite est plus sensible comparativement à celle commerciale. La théobromine commerciale est à 99% pure. Cette différence de sensibilité confirme la présence d'autres métabolites mélangés avec la théobromine extraite à partir du cacao. Ces métabolites ont réagi avec l'urée qui engendre une augmentation de la sensibilité de la membrane relative à la théobromine extraite. Ces métabolites peuvent être des polyphénoLs par exemple qui sont présents dans le Cacao.